細胞生長曲線的繪製實驗報告範文

篇一：實驗五 微生物生長量的測定及生長曲線的繪製

一、實驗目的

學習瞭解微生物生長量測定的方法

學習瞭解細菌生長曲線的繪製方法

學習掌握血細胞計數板的使用方法

（一）微生物生長量的測定

計數法 重量法 生理指標法

1、顯微鏡直接計數法

（1）利用血細胞計數板計數

（2）塗片計數

2、活菌菌落計數法

3、濾膜法

（二）細菌生長曲線

將單細胞細菌接種到恆定容積的液體培養基中，不補充營養物或移去培養物，細菌以二分裂方式繁殖，以時間為橫座標，細菌數目的對數值為縱座標，可畫出一條反映細菌在整個培養期間菌數變化規律的曲線，稱為生長曲線（growth curve）

篇二：細胞生長曲線的測定

細胞生長曲線的測定

一、實驗目的

掌握測定細胞生長曲線的方法。

二、實驗器具

24孔細胞培養板、微量加樣器、eppendorf管、吸頭、吸頭盒、顯微鏡、細胞計數板、載玻片、蓋玻片、吸管、試管架、普通顯微鏡、細胞懸液、0.4%台盼藍。

三、實驗方法

1. 培養細胞：首先在24孔細胞培養板內分別接種相同數量的細胞，計數並記錄接種的細胞懸液密度，接種時間記為0小時。

2. 計數細胞密度：從接種時間算起，每隔24小時計數3孔的細胞密度，算出平均值。為提高準確率，對每孔細胞可計數2-3次，如此操作至第七天結束。

3. 繪製曲線：以培養時間為橫座標、細胞密度為縱座標，將全部結果在座標紙上繪圖，即得所培養細胞的生長曲線。

篇三：MTT法繪製生長曲線

實驗材料：

1，5%FBS-L-DMEM, 5x104個/ml細胞懸液，5mg/mlMTT溶液，DMSO,0.01M PBS,2, 96孔板共7個,酶標儀,50ml離心管，1.5ml離心管，0.22μm濾膜，錫箔紙，MTT工作液（1ml/管）

實驗步驟：

1， 分別選取生長良好的P1、P3、P5代BMSCs消化後製備成細胞懸液，調整細胞密度為5x104/ml。接種到96孔板，每孔接種200μl細胞懸液進行培養（每孔1x104細胞）。

2， 培養16-48後，每天選擇6個培養孔各自加入MTT溶液（5mg/ml）20μl，37℃繼續孵育。

3， 孵育4h後終止培養，吸出孔內上清，此時應該傾斜96孔板，用槍頭小心的將上清液吸去，不可吸去下面的結晶顆粒，慢慢吸去。每孔加入150μlDMSO,室温振盪10min，使結晶充分溶解，於試驗孔平行設不加細胞只加培養液的空白對照1孔。

注意事項：

【1】 1, 兩種方法分離小型豬骨髓間充質幹細胞的比較

分別取兩組0,1,3代細胞，製成1x103的細胞懸液，接種到96孔板，每孔細胞懸液200微升，置37℃、5%CO2飽和濕度孵箱內孵育，各組每24小時分別取出4孔，每孔加入MTT（2mg/ml）20微升 37℃孵育，4h後吸棄孔內培養液，每孔加入150微升分析純的二甲基亞碸，移至酶聯免疫檢測儀上振盪10min,用分光光度計在492nm波長處測定每孔的吸光度值（OD492），以OD(492)值為縱座標，時間為橫座標繪製生長曲線

【2】 來自：SD大鼠骨髓間充質幹細胞體外分離培養的實驗研究

大鼠MSCs生長曲線測定：為了定量測定大鼠BMSCs的生長狀況，對來源於同一動物的原代細胞進行連續培養。分別選取生長良好的P1、P3、P5代BMSCs消化後製備成細胞懸液，調整細胞密度為5x104/ml。接種到96孔板，每孔接種200μl細胞懸液進行培養（每孔1x104細胞）。次日起每天選擇6個培養孔各自加入MTT溶液（5mg/ml）20μl，37℃繼續孵育4h後終止培養，吸出孔內上清，每孔加入150μlDMSO,室温振盪10min，使結晶充分溶解，於試驗孔平行設不加細胞只加培養液的空白對照1孔。在酶標儀上選擇570nm波長，以空白孔調零，測定各孔吸光度（A）值，連續測7天，以時間為橫軸，A值為縱軸繪製細胞生長曲線。