化學實驗報告範例

鄰二氮菲分光光度法測定微量鐵

課程名稱：儀器分析

指導教師：李志紅

實驗員 ：張麗輝 李國躍 崔鳳瓊 劉金旖 普傑飛 趙 宇

時 間: 20xx年5月12日

一、 實驗目的：

（1） 掌握研究顯色反應的一般方法。

（2） 掌握鄰二氮菲分光光度法測定鐵的原理和方法。 （3） 熟悉繪製吸收曲線的方法，正確選擇測定波長。

（4） 學會製作標準曲線的方法。

（5） 通過鄰二氮菲分光光度法測定微量鐵在未知式樣中的含量，掌握721型，723型分光光度計的正確使用方法，並瞭解此儀器的主要構造。

二、 原理：

可見分光光度法測定無機離子，通常要經過兩個過程，一是顯色過程，二是測量過程。 爲了使測定結果有較高靈敏度和準確度，必須選擇合適的顯色條件和測量條件，這些條件主要包括入射波長，顯色劑用量，有色溶液穩定性，溶液酸度干擾的排除。

（1）

（2）

入射光波長：一般情況下，應選擇被測物質的最大吸收波長的光爲入射光。 顯色劑用量：顯色劑的合適用量可通過實驗確定。

（3） 溶液酸度：選擇適合的酸度，可以在不同PH緩衝溶液中加入等量的被測離子和顯色劑，測其吸光度，作DA-PH曲線，由曲線上選擇合適的PH範圍。 （4） （5） 干擾。

有色配合物的穩定性：有色配合物的顏色應當穩定足夠的時間。 干擾的排除：當被測試液中有其他干擾組分共存時，必須爭取一定的措施排除2+4鄰二氮菲與Fe 在PH2.0-9.0溶液中形成穩定橙紅色配合物。配合無的ε =1.1 ×10L· mol ·cm-1 。 配合物配合比爲3：1，PH在2-9（一般維持在PH5-6）之間。在還原劑存在下，顏色可保持幾個月不變。Fe3+ 與鄰二氮菲作用形成淡藍色配合物穩定性教差，因此在實際應用中加入還原劑使Fe 3+還原爲Fe2+ 與顯色劑鄰二菲作用，在加入顯色劑之前，用的還原劑是鹽酸羥胺。此方法選擇性高Br3+ 、Ca2+ 、Hg 2+、Zn2+ 及Ag+ 等離子與鄰二氮菲作用生成沉澱，干擾測定，相當於鐵量40倍的Sn2+、Al3+、Ca2+、Mg2+ 、Zn2+ 、Sio32-，20倍的Cr3+、Mn2+、VPO3-45倍的Co2+、Ni2+、Cu2+等離子不干擾測定。

三、 儀器與試劑：

1、 儀器：721型723型分光光度計

500ml容量瓶1個，50 ml 容量瓶7個，10 ml 移液管1支

5ml移液管支，1 ml 移液管1支，滴定管1 支，玻璃棒1 支，燒杯2 個，吸爾球1個， 天平一臺。

2﹑試劑：（1）鐵標準溶液100ug·ml-1,準確稱取0.43107g鐵鹽NH4Fe(SO4)2·12H2O置於燒杯中，加入0.5ml鹽酸羥胺溶液，定量轉依入500ml容量瓶中，加蒸餾水稀釋至刻度充分搖勻。

（2）鐵標準溶液10ug·ml-1.用移液管移取上述鐵標準溶液10ml，置於100ml容量瓶中， 並用蒸餾水稀釋至刻度，充分搖勻。

（3）鹽酸羥胺溶液100g·L(用時配製)

（4）鄰二氮菲溶液 1.5g·L-1 先用少量乙醇溶液，再加蒸餾水稀釋至所需濃度。

（5）醋酸鈉溶液1.0mol·L-1μ-1

四、實驗內容與操作步驟：

1.準備工作

(1) 清洗容量瓶，移液官及需用的玻璃器皿。

(2) 配製鐵標溶液和其他輔助試劑。

(3) 開機並試至工作狀態，操作步驟見附錄。

(4) 檢查儀器波長的正確性和吸收他的配套性。

2. 鐵標溶液的配製準確稱取0.3417g鐵鹽NH4Fe(SO4)·12H2O置於燒杯中，加入10mlHCL加少量水。溶解入500ml容量瓶中加水稀釋到容量瓶刻度。

3 .繪製吸收曲線選擇測量波長

取兩支50ml乾淨容量瓶，移取100μ g m l-1鐵標準溶液2.50ml容量瓶中，然後在兩個容量瓶中各加入0.5ml鹽酸羥胺溶液，搖勻，放置2min後各加入1.0ml鄰二氮菲溶液，2.5ml醋酸鈉溶液，用蒸餾水稀釋至刻度線搖勻，用2cm吸收池，試劑空白爲參比，在440——540nm間，每隔10nm測量一次吸光度，以波長爲橫座標，吸光度爲縱座標，確定最大吸收波長

4.工作曲線的繪製

取50ml的容量瓶7個,各加入100.00μɡ ml-1鐵標準0.00,0.20,0.40,0.60,0.80,1.00,1.20ml，然後分別加入0.5ml鄰二氮菲溶液，2.5ml醋酸鈉溶液，用蒸餾水稀釋至刻度線搖勻，用2cm吸收池，以試劑空白爲參比溶液，在選定波長下測定並記錄各溶液光度，記當格式參考下表：

5.鐵含量的測定

取1支潔淨的50ml容量瓶,加人2.5ml含鐵未知試液,按步驟(6 )顯色,測量吸光度並記錄.

K=268.1 B= -2.205 R*R=0.9945 CONC. =K *ABS+B C = 44.55mol ml-1

6.結束工作

測量完畢,關閉電源插頭,取出吸收池, 清洗晾乾後人盆保存.清理工作臺,罩上一儀器防塵罩,填寫儀器使用記錄.清洗容量瓶和其他所用的玻璃儀器並放回原處.

五、討論：

（1） 在選擇波長時，在440nm——450nm間每隔10nm 測量一次吸光度，最後得出的λmix=510nm,可能出在試劑未搖勻，提供的λmix=508nm，如果再縮減一點進程，試齊充分搖勻，靜置時間充分，結果會更理想一些。

（2） 在測定溶液吸光度時，測出了兩個9，實驗結果不太理想，可能是在配製溶液過程中的原因：a、配製好的溶液靜置的未達到15min；b、藥劑方面的問題是否在期限內使用（未知）因從溶液顯色的效果看，顏色有點淡,要求在試劑的使用期限內使用；c、移取試劑時操作的標準度是否符合要求，要求一個人移取試劑。（張麗輝）

在配製試樣時不是一雙手自始至終，因而所觀察到的結果因人而異，導致最終結果偏差較大，另外還有實驗時的溫度，也是造成結果偏差的原因。（崔鳳瓊）

本次實驗階段由於多人操作，因而致使最終結果不精確。（普傑飛）

（1） 在操作中，我覺得應該一人操作這樣才能減少誤差。

（2） 在使用分光計時，使用同一標樣，測同一溶液但就會得出不同的值。這可能有幾個原因：a、溫度，b、長時間使用機器，使得性能降低，所以商量得不同值。（李國躍） 在實驗的進行當中，因爲加試樣的量都有精確的規定，但是在操作中由於是手動操作所以會有微小的誤碼率差量，但綜合了所有誤差量將成爲一個大的誤差，這將導致整個實驗的結果會產生較大的誤碼率差。（趙宇）

在配製溶液時，加入拭目以待試劑順序不能顛倒，特別加顯色劑時，以防產生反應後影響操作結果。（劉金旖）

六、結論：

（1） 溶液顯色，是由於溶液對不同波長的光的選擇的結果，爲了使測定的結果有較好的靈敏度和準確度，必須選擇合適的測量條件，如：入射波長，溶液酸度，度劑使用期限 。

（2） 吸收波長與溶液濃度無關，不同濃度的溶液吸收都很強烈，吸收程度隨濃度的增加而增加，成正比關係，從而可以根據該部分波長的光的吸收的程度來測定溶液的濃度。

（3） 此次試驗結果雖不太理想，但讓我深有感觸，從中找到自己的不足，並且懂得不少試驗操作方面的知識。從無知到有知，從不熟練到熟練使用使自己得到了很大的提高。（張麗輝）

附錄：

723型操作步驟

1、 插上插座，按後面開關開機

2、 機器自檢吸光度和波長，至顯示500。 3、 按OTO鍵，輸入測定波長數值按回車鍵。

4、 將考比溶液（空白溶液）比色皿置於R位以消除儀器配對誤碼率差，拉動試樣架拉桿，按ABS。01鍵從R、S1、S2、S3，逐一消除然後再檢查1~~2次看是否顯示0。000否則重新開始。

5、 按RAN按3鍵，回車，再按1鍵，回車。

6、 逐一輸入標準溶液的濃度值，每輸一個按回車，全部輸完，再按回車。

7、 固定考比溶液比色皿（第一格爲參比溶液）其餘三格放標準試樣溶液，每測一值，拉桿拉一格，按START/STOP全打印完，按回車

8、 機器會自動打印出標準曲線K、B值以及相關係R。

9、 固定參比溶液比色皿，其餘三格放入待測水樣，逐一測定。

10完畢後，取出比色皿，從打印機上撕下數據，清掃儀器及檯面關機。

AλC

T/A

721型分光度計操作步驟

1、 2、 3、 4、

開機。

定波長入=700。 打開蓋子調零。

關上蓋子，調滿刻度至100。

5、 參比溶液比色皿放入其中，均合100調滿。

6、 第一格不動，二，三，四格換上標液（共計七個點）調換標液時先用蒸餾水清洗後，再用待測液（標液）清洗，再測其分光度（濃度）