高效液相色譜儀驗證方案

驗證文件類別：技術標準編號：v-a-c-004-0部門：驗證委員會 頁碼：共1頁，第1頁高效液相色譜儀驗證方案版 次： ¨ 新訂 ¨ 替代： 起 草： 年 月 日 部門審覈： 年 月 日 審閱會籤： （驗證委員會） 批 準： 年 月 日 實施日期： 年 月 日 複印數： 批准： 分發至：目 錄1. 設備基本情況1.1 概述1.2 基本情況3 職責3.1 驗證委員會3.2 工程處3.3 qc4 驗證內容4.1 安裝確認4.1.1 安裝確認所需文件資料4.1.2 關鍵性儀表及消耗性備品4.1.3 評價儀器的安裝是否符合gmp及供應商提議的要求4.1.4 起草標準操作規程4.2 校正4.2.1 紫外檢測器 固定波長紫外檢測器波長示值誤差的校正 可調波長紫外—可見光檢測器波長示值誤差和重複性誤差的檢定4.2.2 高壓泵4.3 運行確認4.3.1 紫外檢測器4.3.2 高壓泵4.4 性能確認4.4.1 最小檢測濃度4.4.2 定性、定量測量的重複性4.5 擬訂再驗證項目及週期4.6 驗證結果評定與結論1. 設備基本情況1.1 概述本高效液相色譜儀主要由一個二元泵、一個柱溫箱、一個可變紫外檢測器、一個帶有20μl定量環的進樣器和一臺工作站組成，各部分由工作站軟件控制。本儀器主要用於分析原料和成品的有關物質和含量。1.2 基本情況設備編號：設備名稱：高效液相色譜儀型 號：生產廠家： 供貨廠家： 安裝日期： 使用部門： 工 作 間： 保 管 員：2．驗證目的 爲確認高效液相色譜儀測試數據準確可靠，性能穩定，特制訂本驗證方案，對高效液相色譜儀進行驗證。驗證過程應嚴格按照本方案規定的內容進行，若因特殊原因確需變更時，應填寫驗證方案變更申請及批准書，報驗證委員會批准。3 職責3.1 驗證委員會1. 負責驗證方案的審批。2. 負責驗證的協調工作，以保證本驗證方案規定項目的順利實施。3. 負責驗證數據及結果的審覈。4. 負責驗證報告的審批。5. 負責再驗證週期的確定。3.2 工程處1. 負責設備的安裝、調試，並做好相應的記錄。2. 負責建立設備檔案。3. 負責數字顯示器、記錄儀的校正。3.3 質量部1. 負責驗證用對照品、樣品及其它消耗性備品的準備2. 負責備品、備件的保存。3. 負責設備儀器的操作。4. 負責記錄各種測試結果。5. 負責擬訂再驗證項目及週期。6. 負責收集各項驗證、試驗記錄，起草驗證報告，報驗證委員會。7. 負責起草儀器使用、維護保養的標準操作規程。4 驗證內容4.1 安裝確認4.1.1 安裝確認所需文件資料 工程處在設備開箱驗收後建立設備檔案，整理使用手冊等技術資料，歸檔保存。4.1.2 關鍵性儀表及消耗性備品 列出關鍵性儀表及消耗性備品的目錄，彙總統計，作爲儀器的關鍵資料，用來與儀器以後的變動做比較。4.1.3 評價儀器的安裝是否符合gmp及供應商提議的要求 查閱設備採購定單、操作手冊等，列出設備安裝、使用所需條件，包括溫度、溼度、通風條件、電路等。 檢查儀器安裝與使用所處的環境條件，是否符合上述要求。4.1.4 起草標準操作規程 -- 高效液相色譜儀標準操作規程 -- 高效液相色譜儀維護保養規程 -- 高效液相色譜儀校正規程4.2 校正4.2.1 紫外檢測器 固定波長紫外檢測器波長示值誤差的校正通常用一塊濾光片獲得指定波長的光者，可小心將濾光片取出，用高精度的分光光度計檢定。 可調波長紫外—可見光檢測器波長示值誤差和重複性誤差的檢定取120℃乾燥至恆重的基準重鉻酸鉀約60mg，精密稱定，用0.005mol/l硫酸溶液溶解並稀釋至1000ml，搖勻，即得重鉻酸鉀的硫酸溶液將檢測器與記錄儀聯好，接通電源預熱穩定後，用注射器注入重鉻酸鉀的硫酸溶液將吸收池充滿，在235nm、257nm、313nm、350nm波長處檢定儀器的波長示值誤差。將記錄紙速調到4mm/min，將檢測器波長調到較規定波長低5nm處（例如檢定257nm時，檢測器波長先調到252nm，調記錄筆到中間位置，然後每15秒改變1nm，直至規定的波長高5nm處，記錄各點的吸收度，分別找出最小與最大點的波長與標準波長之差即爲波長示值誤差。每點重複測3次，最小與最大值之差即爲波長重複性誤差。標 準：固定波長紫外檢測器波長示值誤差應<±2nm可調波長紫外-可見檢測器波長示值誤差應<±2nm，重複性誤差<±1nm。基線漂移≤5×10-3（au/h）；基線噪聲≤5×10-4（au）最小檢測濃度（靜態）_ch 4×10-8g/ml（奈的甲醇溶液）。4.2.2 高壓泵校正泵流量設定值：將儀器的輸液系統、進樣器、色譜柱和檢測器連接好，以甲醇爲流動相，按表1設定流量，待流速穩定後，在流動相排出口用事先清洗稱重過的容量瓶收集流動相，同時用秒錶計時，準確收集至規定的時間，稱重，按下式計算ss。表1 ss的檢定流量設定值（ml/min）測量次數333收集流動相時間（min）864允許誤差3%2%2%計算公式：fm=(w2-w1)/ρ·t ss = (fm-fs)/fs ×100%其中：fm爲流量實測值(ml/min)，fs爲流量設定值(ml/min)，w2爲容量瓶加流動相的重量(g)，w1爲容量瓶的重量(g)，ρ爲實驗溫度下流動相的密度(g/cm3)，t爲收集流動相的時間(min) 4.3 運行確認進行運行確認的目的是在不使用任何試樣的條件下，確認該儀器能夠達到設計要求。4.3.1 紫外檢測器基線漂移和基線噪聲的測定。 將儀器的各部分連接好，紫外檢測器波長調到254nm，流動相爲100%甲醇，流速爲1.0ml/min，紙速爲5mm/min，吸收度範圍選擇最靈敏檔，開機，待基線穩定後，記錄基線30~40分鐘，計算基線漂移和噪聲。基線漂移應≤5×10-3(au/h),基線噪聲應≤5×10-4(au)。4.3.2 高壓泵流量穩定性誤差sr的檢定。將儀器的輸液系統、進樣器、色譜柱和檢測器連接好，以甲醇爲流動相，按表2 設定流量，待流速穩定後，在流動相排出口用事先清洗稱重過的容量瓶收集流動相，同時用秒錶計時，準確收集至規定的時間，稱重，按下式計算sr 。表2 sr 的檢定流量設定值（ml/min）測量次數333收集流動相時間（min）864允許誤差3%2%2%計算公式：sr = (fmax-fmin)/f×100% 其中：fmax爲同一組測量中流量最大值（ml/min），fmin爲同一組測量中流量最小值（ml/min），f 爲同一組測量中算術平均值（ml/min）。4.4 性能確認4.4.1 最小檢測濃度在靜態條件下，用注射器注入4×10-8g/ml萘的甲醇溶液，樣品峯高應大於或等於兩倍基線燥聲峯高，按下式計算最小檢測濃度。ct=2·hn .c/h式中：ct:最小檢測濃度（g/ml）hn:噪聲峯高（記錄儀格數或實測高度cm）c:樣品濃度（g/ml）h:樣品峯高（記錄儀格數或實測高度cm）4.4.2 定性、定量測量的重複性將1×10—4g/ml 萘的甲醇溶液，注入高效液相色譜儀中，檢測波長254nm，流動相爲甲醇，流速1.0ml/min。重複進樣8次，計算相對標準偏差（rsd），應小於等於1.5% 。4.5 擬訂再驗證項目及週期 質量處負責根據設備儀器情況，確定再驗證週期項目及週期，報驗證委員會審覈。4.6 驗證結果評定與結論qc負責收集各項驗證、試驗結果記錄，起草驗證報告，報驗證委員會。驗證委員會負責對驗證結果進行綜合評審，做出驗證結論。附件1關鍵性儀表及消耗性備品情況儀器名稱儀器編號型 號關鍵性儀表儀表名稱生產廠家型號校正證書編號保存處校正週期消耗性備品品名生產廠家型號數量單位保存處 確認使用部門 年 月 日工程部 年 月 日驗證委員會 年 月 日附件2儀器安裝條件檢查記錄設備名稱設備編號型 號安裝條件要求實際安裝條件溫度10～30℃溼度小於65%通風水電氣汽

其它條件

工作臺不受陽光直射。室內應無腐蝕性氣體或其它影響測定的氣體干擾。周圍應無影響測定的強電場、磁場和強烈震動。 確認使用部門 年 月 日工程部 年 月 日驗證委員會 年 月 日附件3高效液相色譜儀校正記錄設備名稱設備編號型 號溫度：溼度：甲醇密度：泵流量設定值誤差fstw2w1fmfm均值ss標準規定判定檢測者 複覈人 年 月 日確認使用部門 年 月 日工程部 年 月 日驗證委員會 年 月 日附件4 高效液相色譜儀運行確認記錄設備名稱設備編號型 號測試項目 標準規定實測結果結論 實測結果 結論 判定基線漂移≤5×10-3(au/h)基線噪聲≤5×10-4(au)流量穩定性檢測者 複覈者 年 月 日複覈者 年 月 日 確認使用部門 年 月 日工程部 年 月 日驗證委員會 年 月 日附件5高效液相色譜儀性能確認記錄設備名稱設備編號型 號測試項目標準規定測定結果判定最小檢測濃度＜4×10－8g/ml定性定量重複性rsd≤1.5%檢測者 複覈者 年 月 日複覈者 年 月 日確認使用部門 年 月 日工程部 年 月 日驗證委員會 年 月 日附件6 高效液相色譜儀再驗證項目及週期設備編號： 設備名稱： 型號： 序號項目標準驗證方法週期1線路連接檢查線路、接地2附件檢查檢查操作記錄、操作手冊等3清潔清潔儀器外部4泵流量設定值和穩定性基線漂移和基線噪聲最小檢測濃度定性定量重複性詳見驗證方法起草： 工程部長： 驗證委員會： 年 月 日